技術(shù)介紹
tNGS,一種只針對(duì)特定基因序列進(jìn)行高通量測序的技術(shù),通過大量針對(duì)特定基因序列的引物/探針對(duì)待測樣品中抽提出的核酸進(jìn)行超多重PCR擴(kuò)增/探針捕獲,獲得大量目標(biāo)核酸片段,再對(duì)這些目標(biāo)核酸片段進(jìn)行高通量測序,然后對(duì)所得序列進(jìn)行生信分析,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)待測樣本中的核酸進(jìn)行高靈敏以及高分辨率的識(shí)別。
技術(shù)原理
多重PCR靶向測序技術(shù)又稱擴(kuò)增子靶向測序技術(shù),是一種將多重PCR技術(shù)與二代測序技術(shù)相結(jié)合的一種靶向測序技術(shù)。該技術(shù)首先利用多重PCR反應(yīng),同時(shí)擴(kuò)增多個(gè)目標(biāo)區(qū)域序列,得到擴(kuò)增子產(chǎn)物,然后通過PCR反應(yīng)或者酶連接反應(yīng),將二代測序所需的接頭序列(adapter)引入到擴(kuò)增子產(chǎn)物的兩側(cè),得到擴(kuò)增子文庫,然后進(jìn)行二代測序和生信流程分析,獲取目標(biāo)區(qū)域的序列信息,實(shí)現(xiàn)目標(biāo)區(qū)域序列檢測的目的。
雜交捕獲法是一種把分子雜交和二代測序相結(jié)合的靶向測序技術(shù)。該技術(shù)需要設(shè)計(jì)和生產(chǎn)和目的區(qū)域互補(bǔ)的探針,通過固相雜交/液相雜交將目的區(qū)域的片段捕獲下來,再將不需要的部分進(jìn)行洗脫,完成捕獲
技術(shù)特點(diǎn)
更快、更經(jīng)濟(jì),tNGS樣本測序數(shù)據(jù)量約為mNGS的千分之一,它只需針對(duì)特異性擴(kuò)增片段檢測,降低了檢測時(shí)間和成本,同時(shí)數(shù)據(jù)處理結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性明顯提升
更精準(zhǔn),擴(kuò)增性能優(yōu)異:錯(cuò)配率低,特異性高,可進(jìn)行超多重?cái)U(kuò)增構(gòu)建優(yōu)質(zhì)DNA文庫
適用性廣:兼容血液、鼻/咽拭子、病毒培養(yǎng)物等多種樣本,廣泛應(yīng)用于病原微生物檢測、癌癥基因檢測、科學(xué)研究等領(lǐng)域
應(yīng)用場景
技術(shù)介紹
tNGS,一種只針對(duì)特定基因序列進(jìn)行高通量測序的技術(shù),通過大量針對(duì)特定基因序列的引物/探針對(duì)待測樣品中抽提出的核酸進(jìn)行超多重PCR擴(kuò)增/探針捕獲,獲得大量目標(biāo)核酸片段,再對(duì)這些目標(biāo)核酸片段進(jìn)行高通量測序,然后對(duì)所得序列進(jìn)行生信分析,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)待測樣本中的核酸進(jìn)行高靈敏以及高分辨率的識(shí)別。
技術(shù)原理
多重PCR靶向測序技術(shù)又稱擴(kuò)增子靶向測序技術(shù),是一種將多重PCR技術(shù)與二代測序技術(shù)相結(jié)合的一種靶向測序技術(shù)。該技術(shù)首先利用多重PCR反應(yīng),同時(shí)擴(kuò)增多個(gè)目標(biāo)區(qū)域序列,得到擴(kuò)增子產(chǎn)物,然后通過PCR反應(yīng)或者酶連接反應(yīng),將二代測序所需的接頭序列(adapter)引入到擴(kuò)增子產(chǎn)物的兩側(cè),得到擴(kuò)增子文庫,然后進(jìn)行二代測序和生信流程分析,獲取目標(biāo)區(qū)域的序列信息,實(shí)現(xiàn)目標(biāo)區(qū)域序列檢測的目的。
雜交捕獲法是一種把分子雜交和二代測序相結(jié)合的靶向測序技術(shù)。該技術(shù)需要設(shè)計(jì)和生產(chǎn)和目的區(qū)域互補(bǔ)的探針,通過固相雜交/液相雜交將目的區(qū)域的片段捕獲下來,再將不需要的部分進(jìn)行洗脫,完成捕獲
技術(shù)特點(diǎn)
更快、更經(jīng)濟(jì),tNGS樣本測序數(shù)據(jù)量約為mNGS的千分之一,它只需針對(duì)特異性擴(kuò)增片段檢測,降低了檢測時(shí)間和成本,同時(shí)數(shù)據(jù)處理結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性明顯提升
更精準(zhǔn),擴(kuò)增性能優(yōu)異:錯(cuò)配率低,特異性高,可進(jìn)行超多重?cái)U(kuò)增構(gòu)建優(yōu)質(zhì)DNA文庫
適用性廣:兼容血液、鼻/咽拭子、病毒培養(yǎng)物等多種樣本,廣泛應(yīng)用于病原微生物檢測、癌癥基因檢測、科學(xué)研究等領(lǐng)域
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